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July 31, 2024

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Validation technique: évaluation des performances de la méthode 1) Répétabilité La répétabilité consiste à analyser un même échantillon par le même opérateur dans les même conditions avec les même réactifs et instruments le même jour. La répétabilité a été évaluée en réalisant 10 fois le dépôt de chacune des 7 souches ATCC dans les conditions standard recommandées par le fournisseur (culture de 18h sur gélose au sang) le même jour par le même utilisateur (n=70) sur la même cible. Gélose — Wikipédia. 2) Fidélité intermédiaire La fidélité intermédiaire consiste à tester la reproductibilité de la méthode. Cela consiste à analyser un même échantillon dans des conditions différentes en faisant varier au moins un paramètre: l'opérateur, le temps, les réactifs et instruments. Pour cela, les 7 souches ATCC ont été déposées en double 5 jours différents, sur 5 cibles différentes et par des opérateurs différents (n=70). Les opérateurs étaient 5 personnes habilitées au dépôt sur cible MALDI. 3) Variabilité inter-opérateurs Pour maîtriser la variabilité inter-opérateurs, il faut vérifier la formation et l'habilitation des opérateurs.

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> Milieu universel utilisé d'une part, pour la culture et l'isolement des bactéries aérobies et anaérobies et, d'autre part pour favoriser la croissance des germes particulièrement exigeants. Composition (g) pouvant être modifiée pour 1 litre de milieu: Tryptone: 15, 0 Peptone papaïnique de soja: 5, 0 Chlorure de sodium: 5, 0 Agar: 15, 0 pH du milieu prêt à l'emploi à 25 °C: 7, 3 ± 0, 2 caractéristiques Stockage: Mil. déshydraté: 2-30 °C Mil. Milieux de culture classiques pour la détection d'infections fongiques - Diagnostic Clinique | bioMérieux France. préparé en flacons: 6 mois à 2-25 °C Mil. préparé en boîtes: 1 mois à 2-8 °C Mil. prêt à l'emploi: 6 mois à 10-25°c

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La gélose au sang frais, comme son nom l'indique, est constituée d'une base nutritive non sélective à laquelle a été ajoutée 5% de sang frais. Elle convient à la culture de certaines bactéries exigeantes, et permet de mettre en évidence le pouvoir hémolytique de certaines bactéries. Cultivent, par exemple, sur ce milieu, les Streptococcus, Neisseria meningitidis, les corynébactéries et bien sûr toutes les bactéries non exigeantes. La base nutritive utilisée est le plus souvent une gélose Columbia ou une gélose Trypticase-soja. Milieux de Culture - Diagnostic Clinique | bioMérieux France. Ces bases doivent être naturellement isotoniques pour éviter la lyse spontanée des hématies et ne doivent pas contenir de glucose car ce dernier inhibe l'hémolyse par les bactéries. Le sang frais utilisé est, au préalable, défibriné pour éviter qu'il ne coagule. C'est presque exclusivement du sang de cheval ou de mouton. Composition gélose Columbia Mélange de peptones 18, 0 g Extrait de levure 5, 0 g Amidon de maïs 1, 0 g Chlorure de sodium Agar 10, 0 g pH = 7, 3 Eau distillée qsp 1 L La gélose au sang + ANC C'est une gélose au sang frais rendue sélective des bactéries à Gram positif en ajoutant deux antibiotiques: l' A cide N alidixique et la C olistine.

Milieux De Culture Classiques Pour La Détection D'infections Fongiques - Diagnostic Clinique | Biomérieux France

La gélose est une substance nutritive favorisant ou inhibant ( selon sa composition) la prolifération et le développement des bactéries. Il s'agit donc du milieu de culture des bactéries. Elle est utilisée dans les laboratoires pour déterminer le niveau d'efficacité de nouveaux antibiotiques, tester la résistance bactérienne vis-à-vis de produits déjà connus, ou plus simplement, pour isoler ou cultiver des bactéries. La gélose se différencie du bouillon, la plupart du temps de bouillon de bœuf, par sa solidité due, dans sa composition, à la présence d' agar-agar à hauteur de 20 g/L environ. Types de géloses [ modifier | modifier le code] Selon son contenu, une gélose peut favoriser la croissance de certaines bactéries aux dépens des autres; c'est ce qu'on appelle la sélectivité. De plus, certaines géloses sont différentielles, c'est-à-dire que l'aspect des colonies bactériennes qui s'y forment peut permettre, jusqu'à un certain point, de déduire de quel type de bactérie il s'agit. Voici quelques géloses courantes dans les laboratoires de microbiologie.

Gélose — Wikipédia

Gélose au sang [ modifier | modifier le code] C'est une gélose rouge vif contenant des globules rouges (souvent du sang de mouton). Peu sélective, elle permet cependant d'apprécier l' hémolyse qu'effectuent certaines bactéries. Les bactéries capables de détruire complètement les globules rouges (ce qu'on appelle une hémolyse bêta) formeront des colonies entourées d'une zone claire facilement visible sur la gélose rouge; si l'hémolyse est incomplète (hémolyse alpha), la zone d'hémolyse sera moins claire et verdâtre. Une hémolyse complète est visible entre autres dans le cas du Streptocoque du groupe A. S. pyogenes sur Columbia au sang. Le sang utilisé pour la fabrication de ces géloses est souvent du sang humain, du sang de cheval ou du sang de mouton (ce dernier est le plus utilisé, car il donne une meilleure hémolyse). Gélose MacConkey [ modifier | modifier le code] Cette gélose est utilisée pour tester la capacité des bactéries à gram négatif à fermenter certains sucres ou sources de carbone.

43464 chromID ® CPS / Columbia ANC 5% sang de mouton Numération des germes dans les urines et identification directe de Escherichia coli, Enterococcus, groupe KESC** et Proteae. 411 617 43466 chromID ® Salmonella / Hektoen Détection simultanée de Salmonella et de Shigella 43465 D rigalski / Mac Conkey (BLSE) Dépistage des Entérobactéries productrices de ß-Lactamase à Spectre Etendu ( BLSE) AEB 525770 Les milieux conventionnels composés Columbia + 5% sang mouton Isolement des bactéries exigeantes. Recherche des hémolyses 43041 43049 Columbia ANC + 5% sang mouton Isolement des bactéries exigeantes.

La variabilité inter-opérateurs est prise en compte dans les essais de Fidélité intermédiaire. 4) Sensibilité et spécificité analytique Pour notre méthode qualitative en portée B, la sensibilité et la spécificité ont été étudiées par une analyse bibliographique. A la place des termes sensibilité et spécificité, la notion de concordance au genre et à l'espèce est préférable pour une méthode d'identification microbienne. Elle est prise en compte dans la comparaison de méthode avec la méthode de référence (voir 8-Comparaison des méthodes). 5) Incertitude de mesures Cette évaluation a été réalisée dans l'étape d'analyse des risques avec la méthode des 5M. 6) Contamination La contamination inter-échantillons entre deux puits sur une cible MALDI-TOF peut entraîner une modification des résultats. L'étude des contaminations a déjà été réalisée au laboratoire de bactériologie. Elle a consisté à déposer sur une cible une alternance de dépôts de bactérie + matrice (n=6) et de dépôts de matrice seule (n=6).
Evaluation Cm1 Geographie Le Lieu Ou J Habite